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狗狂犬病抗體檢測(cè)試劑盒
狗狂犬病抗體檢測(cè)試劑盒
更新時(shí)間:2025-02-06
訪問(wèn)量: 2754
廠商性質(zhì): 生產(chǎn)廠家

我司生產(chǎn)的狗狂犬病抗體檢測(cè)試劑盒采用酶聯(lián)免疫方法(ELISA)檢測(cè)犬血清中的特異性抗狂犬病毒抗體,用于犬只免疫后抗體監(jiān)測(cè)。

狗狂犬病抗體檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品概述:

 

犬狂犬病毒抗體檢測(cè)試劑盒

使用說(shuō)明書

介紹】

狂犬病毒(Rabies virus, RBV)抗體檢測(cè)試劑盒用于檢測(cè)貓、犬等動(dòng)物血清中的狂犬病毒抗體,用于評(píng)估狂犬病毒疫苗免疫狀況。

本試劑盒采用阻斷ELISA法,在酶標(biāo)板條微孔上預(yù)包被狂犬病毒抗原。在試驗(yàn)中,加入稀釋后的待檢血清,經(jīng)過(guò)溫育后,若樣品中含有狂犬病毒特異性抗體,則與包被板上的抗原結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后;再加入酶標(biāo)的抗狂犬病毒單抗,樣本中的抗體阻斷了單抗與包被板上抗原的結(jié)合;經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶結(jié)合物;在微孔中加入TMB底物液,經(jīng)酶催化產(chǎn)生的藍(lán)色信號(hào)與樣本中的抗體含量成反比,加入終止液終止反應(yīng)后,用酶標(biāo)儀450nm波長(zhǎng)測(cè)定反應(yīng)孔中的吸光度A值。

【組份】

1

抗原預(yù)包被板條

1/2塊

7

終止液

11ml

2

酶結(jié)合物

11/22ml

8

陰性對(duì)照

1/2ml

3

10倍濃縮洗滌液

100ml

9

陽(yáng)性對(duì)照

0.5/1ml

4

樣本稀釋液

50ml

10

封板膜

2/4張

5

顯色液

11/22ml

 

 

 

6

說(shuō)明書

1份

 

 

 

【需自備的設(shè)備及試劑】

  • 微量移液器:10µl-100µl、100µl-1000µl。
  • 一次性移液器吸頭。
  • 量筒:500ml。
  • 96孔板酶標(biāo)儀。
  • 蒸餾水或去離子水。
  • 洗瓶或洗板機(jī)。

【樣品制備】

取動(dòng)物全血,按常規(guī)方法制備血清,要求血清清亮,無(wú)溶血。

【洗滌液的準(zhǔn)備】

濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫,如有鹽結(jié)晶,搖動(dòng)使結(jié)晶的鹽溶解,然后用蒸餾水或去離子水作10倍稀釋。稀釋好的洗滌液可在4℃存放一周左右。

【注意事項(xiàng)】

  • 試劑盒使用前各試劑應(yīng)平衡至室溫,使用前應(yīng)搖勻,使用后放回2-8℃。
  • 不同品種、不同批號(hào)試劑盒的試劑組分不得混用,使用試劑時(shí)應(yīng)防止試劑污染。
  • 底物和終止液對(duì)皮膚和眼可能有刺激性,使用時(shí)應(yīng)該注意防護(hù)。
  • TMB(顯色液)不要暴露于強(qiáng)光和避免接觸氧化劑。
  • 檢測(cè)板拆封后應(yīng)避免受潮或沾水(未用完的抗原包被板加干燥劑放于自封袋中,并盡快置于2-8℃)。
  • 所有廢棄物在丟棄之前應(yīng)合理處理以免污染。
  • 嚴(yán)格遵守操作說(shuō)明可以獲得H的結(jié)果。操作過(guò)程中移液、定時(shí)和洗滌等的全部過(guò)程必須精q。
  • 抗原包被板為一次性用品,不得重復(fù)使用; 

【操作步驟】

  • 每次試驗(yàn)均設(shè)置空白孔1孔、陽(yáng)性對(duì)照1孔、陰性對(duì)照2孔,陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照直接取100ul/孔加入孔內(nèi);
  • 將樣品稀釋液按90ul/孔加入到微孔反應(yīng)板內(nèi),之后將待檢樣品血清按10ul/孔加入孔內(nèi)并吹打混勻(移液器槍頭請(qǐng)勿混用);
  • 蓋上封板膜(可按實(shí)際需要自行裁剪),置37℃溫育60分鐘。
  • 小心揭開(kāi)封板膜,甩掉板孔中的溶液,使用工作濃度洗滌液每孔加250ul,后甩去孔內(nèi)液體,以上步驟重復(fù)4-6次,后在干凈吸水紙上拍干。
  • 除空白對(duì)照孔外,每孔加酶結(jié)合物100μl,蓋上封板膜,置37℃溫育30分鐘。
  • 小心揭開(kāi)封板膜,甩掉板孔中的溶液,洗滌4-6次, 方法同4。切記后在干凈吸水紙上拍干。
  • 每孔加顯色液100µl,混勻、蓋上封板膜37℃閉光顯色15分鐘。
  • 每孔加終止液50μl,使反應(yīng)終止,10分鐘內(nèi)測(cè)定結(jié)果。

【結(jié)果判定】

以空白對(duì)照調(diào)零用酶標(biāo)儀于450nm630nm作參比波長(zhǎng))讀取吸光度A值。

試驗(yàn)成立的條件是

N值>0.5、同時(shí)陽(yáng)性對(duì)照(P)阻斷率>50%;

計(jì)算方法:

PI (阻斷率)=  1 —(樣品OD值 / 陰性O(shè)D均值)

陰陽(yáng)性判斷:

PI(阻斷率)>40%則判斷為陽(yáng)性;

PI40%則判斷為陰性。

注:(PI=40%相當(dāng)于抗體滴定度0.5IU/ml)

【有效期】

貯存方法: 2 - 8ºC下貯存。

有效期: 12個(gè)月。

 

 

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