可見(jiàn)分光光度法
植物總酚(TP)含量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū) 貨號(hào):YJS2309
規(guī)格:50T/24S
產(chǎn)品內(nèi)容:
提取液:60%乙醇, 自備。
試劑一:液體 20mL×1 瓶,4℃保存。
試劑二:液體 25mL×1 瓶,4℃保存。
標(biāo)準(zhǔn)品:液體 1mL×1 支,4℃保存。1mg/mL 單寧酸標(biāo)準(zhǔn)溶液。
產(chǎn)品說(shuō)明:
植物酚類物質(zhì)具有清除自由基,抗氧化抗衰老的作用,具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和醫(yī)療保健作用而 廣泛應(yīng)用于化妝品、食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域。
在堿性條件下,酚類物質(zhì)將鎢鉬酸還原,產(chǎn)生藍(lán)色化合物,在 760nm 處有特征吸收峰,測(cè) 760nm 處的吸光值,即可得樣品總酚含量。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:
天平、烘箱、粉碎儀、篩子、超聲破碎儀、60%乙醇、離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1 mL 玻璃比 色皿、蒸餾水。
操作步驟:
一、總酚提取
將樣本烘干至恒重,粉碎,過(guò) 40 目篩之后,稱取約 0. 1g ,加入 2.5mL 提取液,用超聲提取法進(jìn) 行提取,超聲功率 300W ,破碎 5s ,間歇 8s ,60℃ , 提取 30min 。12000rpm ,25℃ , 離心 10min , 取上清,用提取液定容至 2.5mL ,待測(cè)。
二、標(biāo)準(zhǔn)品制備:
將 1mg/mL 單寧酸標(biāo)準(zhǔn)溶液二倍稀釋至 0.3125、0.1562、0.0781、0.0391、0.0195、0.0098、0.0049、 0.0024 、0.0012 、0.0006mg/mL ,待測(cè)。
三、測(cè)定操作表
1 、分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 760nm ,蒸餾水調(diào)零。
2 、操作表
對(duì)照管 | 測(cè)定管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 空白管 | |
樣本待測(cè)液 ( μL) | 50 | 50 | - | |
標(biāo)準(zhǔn)液 ( μL) | 50 | |||
蒸餾水 ( μL) | 50 | |||
試劑一 ( μL) | - | 250 | 250 | 250 |
混勻,室溫靜置 2min | ||||
試劑二 ( μL) | 250 | 250 | 250 | 250 |
蒸餾水 ( μL) | 700 | 450 | 450 | 450 |
混勻,室溫靜置 10 min, 1mL 比色皿,測(cè)定 760nm 吸光值。 |
空白管只測(cè)一次。
四、總酚含量計(jì)算
1 、標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制:
以不同濃度的單寧酸為 x 軸,ΔA(A 標(biāo)準(zhǔn)-A 空白)為 y 軸繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線 y= kx+b。
2 、植物總酚含量計(jì)算:
將ΔA=A 測(cè)定-A 對(duì)照帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線,求 x(mg/mL)。
(1) 按樣本鮮重計(jì)算
總酚含量(mg/g 鮮重)= x×V 提取÷W= 2.5x÷W (2) 按樣本
蛋白濃度計(jì)算
總酚含量(mg/mg prot)= x×V 提取÷(V 提取×Cpr)= x ÷Cpr
V 提?。禾崛∫后w積,2.5 mL;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣品質(zhì)量,g。
注意事項(xiàng):
(1)OD 值大于 1.0 ,樣品適當(dāng)稀釋再測(cè)定,注意計(jì)算公式里乘以稀釋倍數(shù)。
(2)試劑一對(duì)皮膚有一定的刺激性,請(qǐng)操作時(shí)做好防護(hù)措施。
本產(chǎn)品僅供科學(xué)研究使用!請(qǐng)勿用于臨床、診斷、食品、化妝品檢測(cè)等用途!
從2011年開(kāi)始我們致力于在生命科學(xué)領(lǐng)域、生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)及論文潤(rùn)色服務(wù),協(xié)助客戶各類實(shí)驗(yàn)服務(wù)及論文潤(rùn)色十多年,是您值得信賴的科研合作伙伴!
如果您受時(shí)間、試驗(yàn)條件等限制而無(wú)法完成您的課題研究,歡迎您與我們聯(lián)系。
實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù):
實(shí)驗(yàn)室代做實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目
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細(xì)胞熒光染料標(biāo)記檢測(cè)實(shí)驗(yàn)
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染色質(zhì)免疫沉淀分析(CLIP)實(shí)驗(yàn)服務(wù)
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